Sekitar sistem pelapisan kromatografi cecair tekanan rendah: penyelidikan dan penyediaan industri seperti biokimia, kimia sintetik, produk semulajadi, pembangunan ubat-ubatan, kimia makanan, kimia pertanian, kosmetik, polimer dan petrokimia. Kaedah-kaedah lain yang boleh dilakukan pelarisan pertukaran ion, pelarisan afinitas, pelarisan penapisan gel, pelarisan hidrofobi, digunakan untuk analisis pemisahan, pengesanan aliran protein, enzim, asid nukleotida, polipeptida, (mengandungi / tidak mengandungi asid amino aromatik) dan mana-mana sampel biologi / bukan biologi yang diserap UV, adalah pilihan yang ideal untuk pemurnian molekul biologi, ia mempunyai banyak fungsi, penggunaan yang mudah, ekonomi dan ciri-ciri lain. Reka bentuk yang kecil untuk memaksimumkan penjimatan ruang dalam gudang sejuk dan makmal.

Nota

Pelbagai keperluan penunjuk teknikal pengesan UV sinar ganda berprestasi tinggi dalam konfigurasi sistem digunakan untuk pengujian kuantitatif kilang ubat-ubatan di seluruh negara. Ciri-ciri peralatan

Pengukuran panjang gelombang ganda protein 280nm / 254nm

Molekul protein mengandungi asid amino aromatik seperti tyrosine dan triane yang mempunyai ikatan ganda. Mereka mempunyai sifat-sifat penyerapan cahaya UV, puncak penyerapan pada panjang gelombang 280nm, dan dalam panjang gelombang ini nilai kepadatan optik yang diserap adalah berkaitan positif dengan kepekatannya, jadi boleh menjadi asas pengukuran kualitatif dan kuantitatif protein, kerana itu, kaedah penyerapan UV pada 280nm biasanya digunakan untuk pemantauan berterusan kepekatan protein dalam sistem analisis. Tetapi kerana kandungan tirosin dan tritin dalam pelbagai protein berbeza, untuk menentukan kuantiti yang tepat, perlu mempunyai produk tulen protein yang akan diukur sebagai piawaian untuk membandingkan, atau telah mengetahui faktor pengurangan cahaya sebagai rujukan. Di samping itu, banyak bahan bukan protein juga mempunyai keupayaan penyerapan tertentu pada panjang gelombang 280nm, yang mungkin mengganggu. Terutamanya, kesan asid nuklear (purin dan pyrimidine) lebih teruk. Penyerapan pada 280nm adalah 10 kali lebih kuat (per gram) daripada protein, tetapi

Asid nuklear menyerap lebih kuat di 254nm dan puncak penyerapannya adalah berhampiran 254nm. Asid nuklear pada 254nm adalah dua kali ganda daripada 280nm, manakala protein sebaliknya, penyerapan UV 280nm lebih besar daripada nilai penyerapan 254nm.

Biasanya

Nisbah penyerapan cahaya protein tulen: A280/A254 1.8

Nisbah penyerapan cahaya asid nuklear tulen: A280/A254 0.5

Oleh itu, apabila asid nuklear berada dalam larutan protein pada masa yang sama (kebanyakan sistem biologi), OD254nm mesti diukur pada masa yang sama dengan OD280nm. Kemudian, mengikut nisbah penyerapan kedua-dua panjang gelombang, kandungan sebenar protein diperkirakan dengan formula empirik untuk menghapuskan kesan asid nuklear.

Kepekatan protein = 1.45 × A280-0.74 × A254 (mg/ml)

Formula eksperimen ini diulah dengan data yang diukur oleh satu siri campuran protein (enanolase ragi) dan asid nuklear (asid nuklear ragi) yang diketahui mempunyai kepekatan yang berbeza.

Konfigurasi Sistem